【求助/交流】请教质粒线性化是指什么意思

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/20 06:38:16
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fungixx(站内联系TA)你可以同时做一个对照 使用你的酶之外的另一种容易切割的酶和这种酶进行双酶切,这样就能判断是否完全切割吧liu2007(站内联系TA)单酶切后,因为单酶切的质粒为线状构象,而没切开的质粒为环状,电泳能完全分开这两种构象,再回收线性化的条带用于转化就可以了.
也可以取少许酶切样品检测,发现单酶切切得很完全,就可直接用此样品纯化后做转化.gundamba(站内联系TA)做个电泳就可以了,首先,线性化的质粒跑的比酶切之前的质粒慢,再者,线性化的质粒同MARKER比较,显示的是真实的大小,可以看你质粒大小来区分crab1983(站内联系TA)我酶切之后的质粒跑的比质粒快,是两条带能分出大小,这个质粒上有两个我用来线性化酶的酶切位点,所以我现在分不清这种情况是不是单酶切的结果.susizheng(站内联系TA)Originally posted by crab1983 at 2010-04-12 09:31:44:
我酶切之后的质粒跑的比质粒快,是两条带能分出大小,这个质粒上有两个我用来线性化酶的酶切位点,所以我现在分不清这种情况是不是单酶切的结果.你用的是哪个载体?一般线性化都是选择单一的酶切位点进行单交换重组的,你要切下整个表达元件做双交换?那肯定是要做回收的.另外的话,根据maker应该知道哪条是你需要的带,然后回收就可以了.

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