cDNA能存放多久请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/26 07:12:04
cDNA能存放多久请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电

cDNA能存放多久请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电
cDNA能存放多久
请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电泳还是用Angilent 2100检测?哪个更有效?还有如果扩增出来的浓度跟三个月前的同一样品扩增出来的少了一大半,其中除了cDNA时间长短不一样之外,还换了一种dNTP mix,请问:dNTP mix换了会对扩增效率有影响么?
mix虽然换了,但还是同一家公司的,只是由原来的2.5mMmix换成10mM的dATP。分开装的,用时各250μl,配成1000μl的mix再用的,这样也不行么?
电泳是琼脂糖的还是聚丙烯酰胺的好呢?片段大小是100bp左右的。

cDNA能存放多久请问cDNA在-80°C冰箱能存放多久?我的cDNA是经反转酶和消化酶作用后的单链DNA,在-80°C冰箱放了半年,中间有六-七次反复冻融,请问还能用么?另外,如何证明这些cDNA已经降解了?跑电
1.cDNA在-20度保存半年都可以,更别说-80度.证明cDNA已经降解的最好的办法就是你跑个内参基因的PCR.跑出条带就说明没有降解.
2.跑核酸都是用琼脂糖跑的,100bp大小的话用1.8%浓度琼脂糖跑
3.dNTP mix换了一般影响不大

1.单链不稳定,建议重做
2.跑电泳检测更好
3.MIX换了,纯度很难保证