电泳加样为什么要煮沸sds-page
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 12:23:55
电泳加样为什么要煮沸sds-page
电泳加样为什么要煮沸
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电泳加样为什么要煮沸sds-page
你是做什么电泳?用的什么东西?要达到什么目的?请把问题说清楚
加热是SDS-PAGE测量蛋白质复合物分子量的必须步骤.
通过加热,促进蛋白形成椭圆结构,椭圆的短轴一致,长轴依据蛋白的分子量而不同,在电泳中表现为不同的泳动速率,与蛋白标准对照,从而达到测定分子量的目的.
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素.如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠 (SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而消除了蛋白质原有的电荷差别,使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量,而与蛋白质所带的电荷无关,在一定条件下,蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关.
加热会使蛋白质变性,肯定会改变复合物的性质,只要不是改变分子量/表观分子量,就不会影响结果.
样品与上样buffer*****
我做SDS-PAGE的时候上样没有要加热
我们的样品还是冷藏在冰箱里的
晕..
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sds-page电泳样品不煮沸可以保存吗sds-page电泳时,只破碎完了细胞,上清和沉淀不加上样缓冲液煮沸,可以保存吗?还有如果加了上样缓冲液煮沸后.该怎么保存呢,
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sds-page电泳 胶凝好后拔出梳子,胶孔黏在一起,吹不开,无法上样,是为什么?
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我提取的未知的粗酶液,做SDS-PAGE电泳,为什么蛋白样品要煮沸处理?煮沸离心后我的蛋白是不是会被离掉?这是为何啊?如果这样蛋白质是不是变性啦?那那些markers也需要煮沸才能上样么?
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