怎样从基因文库中提取目的基因

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 00:03:05

怎样从基因文库中提取目的基因
怎样从基因文库中提取目的基因

怎样从基因文库中提取目的基因
PCR技术是DNA扩增技术,它能在比较短的时间内产生大量的DNA.在获取目的基因后才使用PCR技术.
获得目的基因的方法：
一、构建基因文库
提取总DNA.
用限制性内切酶将总DNA切成小片段,连到质粒或噬菌体载体上,把这些质粒转化到细菌,随着细菌繁殖而复制,这个过程又称为基因克隆（gene clone）
将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,便构成了该生物的基因文库（gene library）.
二、反转录人工合成互补DNA
细胞核中转录的mRNA,已经加工去除内含子,只有外显子（编码蛋白质的序列）,比构建基因文库优越,因此,先从细胞中提取所需的mRNA.
以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成互补的DNA片段(complementary DNA,cDNA),在逆转录完成时,mRNA被降解.在大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段的作用下,再以第一条DNA为模板,合成另一条互补DNA链.
优点在细胞分化各阶段细胞往往转录出特异的编码特殊蛋白质的mRNA.因此,用cDNA方法获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因.

怎样从基因文库中提取目的基因为什么从基因文库中提取目的基因时不需使用限制酶? 为什么从基因文库中提取目的基因更方便?就是想不通那里方便了为什么要构建基因文库直接从含有目的基因的生物中提取不行吗从基因文库中获取目的基因的根据是如何从基因文库中筛选目的基因如何从基因文库中获取目的基因? 怎样从基因文库中获取目的基因?（并不是其构建过程）为什么从基因组文库中提取目的基因和从CDNA文库中提取目的基因可以使用同一种探针?如题,基因组文库含有外显子,也能这么用吗? 为什么要构建基因文库而不是直接从含目的基因的生物体内提取为什么要构建基因文库?直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗? 为什么要建立基因文库,直接从含目的基因的生物体内提取不行吗? 如何从cdna文库提取目的基因为什么提取的时候要用一段核苷酸链? 从基因文库中获取目的基因的过程中,需要的限制性内切酶有能否用限制酶直接从基因文库中切割获得目的基因为什么从基因文库中获取目的基因不需要限制性核酸内切酶? 从基因文库中获取目的基因需要模板链答案是不需要为什么从基因文库中获得目的基因需要模板链吗