我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带.

我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 酶切不出来,是怎么回事?转化涂板挑菌后,摇菌6-8h后,我用先前目的片段的引物,做了个菌液PCR,电泳后表明目的片段从菌液中扩出来了,这个应该说明目的片段连接到载体中了的,但我提出质粒后, 如何挑单克隆摇菌 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 电转化酵母后,涂布YPDS平板仅有少数单克隆出现,挑单科,摇菌 诱导,所有都没有表达,请问什么原因本人是新手,载体是pPICZA,宿主菌是GS115 连接到T载体上面后,做双酶切,条带不正确,目的片段变大是什么原因 单克隆菌落就一定是单基因型吗?有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 如何画出连有目的片段的载体结构图?想做个示意图,就是一个载体结构图和一个目的片段图（ORF）,两个图拉一个二合一的箭头,下面一个连接后的载体结构图,并标明了目的片段具体的位置的 有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?目的基因先后连接到T载体和表达载体之后,接种到培养液中,培养液在摇床上培养12-16h后提取的质粒.现在质粒快用完了,但是目的基因 急救：在平板上挑单克隆摇菌为什么总是摇不出来? 转化子为什么在LB液体培养基上培养不出来用PBI121与我的目的片断酶切连接构建植物表达载体,连接后使用DH5α做的感受态转化,长出转化子,但是挑单克隆到具相应抗性的LB液体培养基上培养却 穿刺菌去测序的原理和步骤是什么?特别想知道,他们是怎么切出我连在载体上的目的片段的. TA克隆全是阴性我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体, 为什么篮斑做PCR菌液鉴定也能P出来条带呢我用蓝白斑做的 T载体和目的片段连,为什么篮斑的 做PCR菌液鉴定也能P出来条带呢? 我把我的目的片段连在载体上,菌液送公司测序起始密码子有两个碱基有误,是否很大可能是公司测序的问题?菌液和酶切检测都没有问题!送测序是我自带的加了酶切位点的引物!我的目的片段