法医常用的DNA检测试剂盒及其原理请列举并简要说明原理最好能说明下原理相关的位点

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 17:13:38
法医常用的DNA检测试剂盒及其原理请列举并简要说明原理最好能说明下原理相关的位点

法医常用的DNA检测试剂盒及其原理请列举并简要说明原理最好能说明下原理相关的位点
法医常用的DNA检测试剂盒及其原理
请列举并简要说明原理
最好能说明下原理相关的位点

法医常用的DNA检测试剂盒及其原理请列举并简要说明原理最好能说明下原理相关的位点
目前常用的试剂盒为16位点的STR试剂盒,以PowerPlex® 16 System(美国Promega公司)和AmpFℓSTR® Identifiler PCR Amplification Kit (美国Applied Biosystems公司)最常用.
原理就是根据遗传学原理,比对父子母每个位点的等位基因型,然后结合统计学计算出个人排除率和父权指数.具体分析起来很复杂.
相关位点可以参考网站STRBase.

PCR扩增DNA样本,再DNA分子探针检测。

就是碱基互补配对原理啊
A-T G-C互相配对
如果不明白可以互相交流的~~~

原理
细胞核染色质DNA断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时,核酸内切酶被激活,选择性降解染色质DNA,形成50-300 kb的大片段,并进而在核小体连接处断裂,形成180-200 bp或其整倍数的DNA片段,这些DNA片段可从细胞中提取出来,通过琼脂糖凝胶电泳,溴化乙啶染色呈现为梯状条带(DNA Ladder),并据此判断细胞凋亡产生。凯基细胞凋亡DNA Ladder检测试剂盒提供...

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原理
细胞核染色质DNA断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时,核酸内切酶被激活,选择性降解染色质DNA,形成50-300 kb的大片段,并进而在核小体连接处断裂,形成180-200 bp或其整倍数的DNA片段,这些DNA片段可从细胞中提取出来,通过琼脂糖凝胶电泳,溴化乙啶染色呈现为梯状条带(DNA Ladder),并据此判断细胞凋亡产生。凯基细胞凋亡DNA Ladder检测试剂盒提供了一种简便、快速地提取染色质DNA的方法,并增加对小片段DNA的回收,从而增强了检测的敏感性。
操作步骤
1. 离心收集105~106细胞(1500×g,5min)于1.5mL微量离心管中;
2. 用PBS洗涤细胞二次(离心1500×g,5min),弃上清;
3. 沉淀的细胞中加入100μL Lysis Buffer,涡旋振荡器上剧烈混合10秒,离心1000×g,5min)移上清于另一1.5mL微量离心管中;
4. 沉淀再加入100μL Lysis Buffer重复上步,合并两次的上清液;
5. 在上述合并的上清液中加入20μL Solution A,再加入20μL Enzyme A, 55℃反应1小时;
6. 加入20μL Enzyme B,37℃,1小时;
7. 加入130μL Precipitant和950μL冷乙醇, 混匀, 置—20℃,1小时以上或过夜;
8. 4℃,12,000-14,000 rpm离心15-30min,小心地弃去上清,收集沉淀的DNA;
9. 加入0.5mL 70%的冷乙醇,洗DNA沉淀,再12,000-14,000 rpm离心20min;
10.弃上清,DNA沉淀于室温干燥10 min后,加入10-15μL TE Buffer,充分搅拌溶解DNA;
11.取上述10-15μL样品加入2-3μL Loading Buffer, 1.5%琼脂糖凝胶电泳(凝胶和电泳缓冲液TBE均加入0.5μg/mL的溴化乙啶);
12.5V/cm电泳1小时,紫外灯下观察并拍照。

收起