作业帮请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）时,需做标准曲线吗?请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）以及叶绿素含量时,需做标准曲线吗?具
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 20:13:04
请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）时,需做标准曲线吗?请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）以及叶绿素含量时,需做标准曲线吗?具
请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）时,需做标准曲线吗?
请问用分光光度计测定（丙酮酸脱羧酶,乙醇脱氢酶,乳酸脱氢酶）以及叶绿素含量时,需做标准曲线吗?具体的方法和计算公式是什么?
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（1）确定最大吸收波长：如果前三个物质都有紫外吸收的话,可以用各自的标准品配成一定浓度的标准溶液,先做200-400nm间的光谱扫描（没有颜色就不必做400-800nm扫描了）.确定各自的最大吸收波长,在后面的定量测定时就在该波长下测定A.叶绿素的最大吸收波长可以查资料,在可见和紫外光区都有吸收（也可以照前三个物质做光谱扫描确定）.
（2）确定各自的线性范围：取每一种物质的标准品配成浓度不等的一系列标准溶液（浓度范围较宽些,浓度点多一些）,测定A值,然后用Excel或Origin作图,根据图像可以判断是否有线性,线性的浓度范围是多少.这是后续定量测量时的浓度控制范围.
（3）测定：按线性范围的要求配制5-8个浓度不等的标准溶液（最好成等差数列）,同时配制试样溶液.测定它们的吸光度值,用Excel或Origin进行标准溶液浓度C与A的线性回归处理,得回归方程.将试样的A代入方程,可算得浓度.后面的处理你知道的.
如果几个都紫外吸收,吸收峰又部分重迭的情况,就必须用多波长测定,列方程联合求解的方法来测定（须预先测定各自在不同波长下的摩尔吸光系数值）,单个测量是不行的.