连接然后转化大肠杆菌注意事项我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 16:37:33
连接然后转化大肠杆菌注意事项我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因.

连接然后转化大肠杆菌注意事项我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因.
连接然后转化大肠杆菌注意事项
我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因.

连接然后转化大肠杆菌注意事项我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因.
可能原因:1、 感受态效率低
2、培养基抗生素加的不对或者量加错.
3、涂平板时涂布棒没有充分冷却.
4、连接效率低.

连接然后转化大肠杆菌注意事项我有一段1.8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因. 重组质粒转化大肠杆菌注意事项(用热击法). PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? 大肠杆菌转化后长得很慢,提质粒跑电泳条带很淡我是用的一种基因缺陷性大肠杆菌做感受态,然后将连接好的质粒转入(连好的质粒里含有缺少的基因片段),涂平板以后需要24h才有菌落长出,挑 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带(即之前的连接产物,约3k 大肠杆菌转化法是什么东西?老师说没有这种转化法.请问究竟有没有?我怎么听着耳熟呢? 用乳糖胆盐培养基检测大肠杆菌,怎么培养及计数.有什么注意事项 您好转化大肠杆菌中什么叫入门载体,然后他又和什么载体交换? 电路连接的注意事项 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 质粒转化大肠杆菌的目的? 一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因.利用卡那霉素抗性基因内部的EcoRI酶切位点进行人类生长激素基因的克隆.二者连接后转化对两种抗生素都敏感的大肠杆菌菌株.如何 转化大肠杆菌超级感受态(购买)已经1年不成功,我实在没办法,只有发帖求助了,望热心有志之士不吝赐教!转化前载体与DNA于16℃连接12h,感受态冰上化冻后立即加入连接产物,冰上放置20-30min, 从胰岛B细胞中得到胰岛素的mRNA,然后通过逆转录得到了cDNA.随后再将它插入原细胞表达载体成功转化到大肠杆菌之后,却始终得不到有活性的胰岛素,为什么? 有没有实现中英文转化的小软件?推荐一个,我要翻译一段英文. 用氯化钙法将质粒DNA转化入大肠杆菌实验中,转化成功的关键因素有哪些? 转化pET32a一个菌落也不长是什么原因啊我在做分子克隆,克隆了四个片段,要在pET32a载体上表达,可是酶切,连接,转化大肠杆菌BL21以后一个菌落也不长,我已经试过各种载体和目的片段的比例,而 用氯化钙法将质粒DNA转入大肠杆菌实验中,转化成功的关键有哪些?